<tbody id="zlg4l"><pre id="zlg4l"></pre></tbody>

  1. <dd id="zlg4l"><noscript id="zlg4l"></noscript></dd><dd id="zlg4l"><pre id="zlg4l"></pre></dd>
  2. <button id="zlg4l"><object id="zlg4l"></object></button>

    <th id="zlg4l"></th>

      1. <nav id="zlg4l"></nav>
      2. 招聘信息

        新闻中心

        当前位置:首页>新闻中心 > 公司动态 >

        ADCC简介

        抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用(ADCC,antibody dependent cellular cytotoxicity)是指抗体的Fab段结合病毒感染的细胞或肿瘤细胞的抗原表位,其Fc段与杀伤细胞(NK细胞、巨噬细胞等)表面的FcR结合,介导杀伤细胞直接杀伤靶细胞。

        活细胞动力学成像

        ADCC的过程

        IgG抗体可介导多种杀伤细胞发挥ADCC作用,其中NK细胞是发挥ADCC作用的主要细胞。在抗体介导的ADCC作用的发生过程中,抗体只能与靶细胞上的相应抗原表位特异性结合,而NK细胞等效应细胞可杀伤任何已与抗体结合的靶细胞,抗体与靶细胞上的抗原结合是特异性的,NK细胞等对靶细胞的杀伤作用是非特异性的。

        ADCC的研究方法

        活细胞动力学成像

        是时候介绍活细胞动力学成像法进行ADCC实验了!

        01

        成像法原理

        通过对靶细胞进行荧光标记,常用染料为活细胞染料Calcein AM。加入效应细胞和抗体后,一旦发生ADCC作用,靶细胞会释放出Calcein AM染料,细胞内荧光变弱,后续利用BioTek成像实时观察靶细胞荧光图片,并进行量化分析。

        区分靶细胞和效应细胞

        具体设置

        02

        软件自动分析

        Gen5软件可以自动计算每个样品孔所有数据点的绿色荧光细胞个数,继而转化成计算曲线下面积(AUC)。利用以下公式计算ADCC作用。

        自动分析曲线下面积

        活细胞动力学成像

        03

        已经有多篇文献报道成像法用于ADCC检测,让我们一起来看看吧。

        文献1

        活细胞动力学成像

        眼见为实

        活细胞动力学成像

        活细胞动力学成像

        左右滑动查看更多,点击可放大

        Time 0为初始图片,Time 4为四小时后图片。

        其中NK-92_158V细胞为CD16a表达的效应细胞,B淋巴细胞为靶细胞。

        动力学VS终点法

        左右滑动查看更多

        在孵育1小时的样品组中,动力学法仍然可以识别出ADCC效应,而终点法则很难识别出来。

        在孵育4小时的样品组中,两种方法的EC50相差无几。利用动力学法,可以保证灵敏度的同时,缩短实验时间。

        文献2

        活细胞动力学成像

        多重数据

        活细胞动力学成像

        活细胞动力学成像

        左右滑动查看更多,点击可放大

        NK细胞介导K562细胞溶解

        04

        ADCC应用场景

        举个例子用于筛选单抗、肿瘤治疗。

        已知CD20蛋白为B细胞表面抗原,淋巴瘤、白血病等疾病治疗的目标靶点。HER2蛋白广泛表达于乳腺癌及胃/食管癌。

        下图蓝色线为利妥昔单抗用于CD20表达BJAB细胞(淋巴瘤细胞);红色线为曲妥珠单抗用于HER2表达的SKBR3细胞(乳腺癌细胞)。两种单抗均展示出ADCC作用。

        活细胞动力学成像

        活细胞动力学成像的方法不仅可以应用在ADCC实验中,也适用于检测CTL(T细胞杀伤实验)、CDC(补体依赖的细胞毒性作用)和NK细胞杀伤实验等。

        引用文献:

        1. Kamen L, Thakurta T, Myneni S, Zheng K, Chung S. Development of a kinetic antibody-dependent cellular cytotoxicity assay. J Immunol Methods. 2019;468:49‐54. doi:10.1016/j.jim.2019.02.006

        2. Fassy J, Tsalkitzi K, Salavagione E, Hamouda-Tekaya N, Braud VM. A real-time digital bio-imaging system to quantify cellular cytotoxicity as an alternative to the standard chromium-51 release assay. Immunology. 2017;150(4):489‐494. doi:10.1111/imm.12702

        相关链接:

        是时候介绍这套靠谱的低氧活细胞检测系统了

        今日要闻!大视野活细胞智能成像系统震撼来袭!

        活细胞显微观测好累?BioTek Lionheart FX 来帮您!

        还没用过BioTek的活细胞工作站?你OUT啦!

        友情链接:

        Copyright ? 1997-2009 Beijing Dequan Xingye Commerce and Trade Co,.LTD , All Rights Reserved  

        北京网站设计信达互联
        永久免费观看美女裸体的网站_亚洲日韩av无码一本到_欧美老少配孩交_国产网红无码精品视频